Light-upDrug — Sondes click fluorogéniques excitables à deux photons pour imager des médicaments en milieu biologique

L’imagerie par fluorescence a pour avantage une grande sensibilité, une haute résolution, une imagerie dynamique et constitue l'un des moyens les plus simples de développer des sondes "turn-on". Pour pallier la faible pénétration des photons dans les tissus biologiques, les fluorophores dans le proche infrarouge sont des outils importants. La microscopie de fluorescence à excitation à deux photons est particulièrement intéressante dans ce domaine, car elle permet d'exciter une sonde dans le proche infrarouge et dans un petit volume au point focal, ce qui augmente la résolution tout en limitant les photodommages possibles. Pour identifier la localisation cellulaire d'un médicament, une stratégie consiste à le conjuguer avec un tel fluorophore. Cependant, la conjugaison peut induire une perte de liaison avec la cible du médicament, ainsi qu'une altération de la perméabilité cellulaire. L'utilisation de la chimie click est une bonne alternative pour surmonter cet inconvénient. Ainsi, l'ajout d'une petite fonction bioorthogonale limite les changements structurels et permet la fixation du fluorophore par une réaction click. Cependant, les fluorophores clickables sont généralement utilisés en excès pour favoriser la réaction click dans les milieux biologiques. La discrimination de la fluorescence issue du conjugué versus celle du fluorophore nécessite des étapes de lavage, ce qui n'est pas possible in vivo. Le projet Light-upDrug vise à développer des sondes fluorogéniques excitables à deux photons. De telles sondes devraient améliorer les technologies actuelles en permettant l'imagerie de médicaments dans des cellules vivantes sans étapes de lavage, ainsi que des applications potentielles pour l'imagerie de médicaments in vivo. Deux types de réactions seront étudiés : 1) les réactions sans métal: soit Diels-Alder à demande inverse, soit cycloadditions entre alcyne contraint et sydnone (SPSAC); 2) les réactions pour lesquelles le cuivre est chélaté par la sydnonimine.