CARDIOPEG — Fonction des récepteurs ß-adrénergiques cardiaques selon leur localisation dans le tubule transverse ou à la membrane de surface : Une stratégie d'exclusion par la taille utilisant des ligands PEGylés

Les myocytes cardiaques possèdent une membrane de surface et un réseau dense de tubules transverses (TT), qui sont des invaginations de la membrane de surface qui pénètrent à l'intérieur de la cellule. De nombreuses protéines membranaires sont localisées à la fois dans la membrane de surface et dans la membrane des TT : c’est le cas notamment des récepteurs ß-adrénergiques (ß-AR). Notre but est d'explorer la fonction des ß-AR dans ces deux compartiments membranaires. Pour cela, nous synthétiserons des ligands ß-AR constitués de molécules de polyéthylèneglycol (PEG) greffées à divers agonistes ou antagonistes des sous-types de ß-AR (ß1-AR, ß2-AR). Nous avons vérifié au préalable que ces ligands PEGylés ne peuvent accéder aux TT, du fait de leur encombrement stérique. Nous allons ensuite comparer sur une même cellule l'effet d'un agoniste libre A et d'un agoniste PEGylé A, ou de la combinaison d’un agoniste libre A et d’un antagoniste PEGylé B, ou vice-versa, afin de distinguer le rôle des ß-AR selon qu'ils sont localisés dans la membrane de surface ou dans la membrane des TT. Les expériences seront réalisées sur des myocytes ventriculaires de rats adultes. Du fait de récents travaux suggérant des différences en fonction du sexe des voies de signalisation ß-AR/AMPc, les expériences seront réalisées à la fois sur des animaux mâles et femelles pour comparaison.