IntraTensionReg — Régulation de la tension de la membrane intracellulaire par les myosines non conventionnelles.

Les biomembranes délimitent la surface cellulaire et les organites et servent de plates-formes pour une multitude de processus moléculaires. La tension est une propriété majeure des membranes. Elle contribue de manière significative à la régulation de la déformation des membranes et à leur altération topologique lors des événements de fusion et de fission. Par conséquent, la tension membranaire est une propriété essentielle pour réguler la dynamique membranaire des cellules. Malheureusement, les données sur la tension endomembranaire et sa régulation sont limitées en raison du manque d'outils établis pour la mesurer, ce qui empêche une compréhension complète de la dynamique des organelles. L'objectif de cette proposition est de révéler de manière exhaustive les mécanismes moléculaires régulant la tension membranaire intracellulaire au cours de l'autophagie, une voie autodigestive caractérisée par des déformations endomembranaires majeures. En particulier, nous nous concentrerons sur la régulation de la tension membranaire par les moteurs actine-dépendants de la famille des myosines. Notre hypothèse est que les myosines non conventionnelles, Myo1B et Myo1C, connues pour réguler l'autophagie, potentiellement aidées par Myo7A également présente au niveau des lysosomes, exercent leurs fonctions distinctes en contrôlant la tension membranaire. Ici, nous effectuerons des mesures résolues en 3D de la tension de la membrane lysosomale grâce au développement d'une microscopie FLIM rapide et à haute résolution dans les cellules pendant l'autophagie (WP1). Nous combinerons cette approche avec des études mécanistiques de reconstitution in vitro à partir de vésicule unilamellaires géantes (GUV) et d’organites (WP2) et une analyse structure/fonction de ces moteurs (WP3). Notre étude multi-échelle permettra de fournir des détails sans précédent sur la façon dont les myosines non conventionnelles 1 et 7A régulent la tension membranaire au cours de l'autophagie.